
檢測到陽性結果,然後呢?
盡管所有實驗動物管理人員都不(bú)希望拿到一份微生物檢測陽性的(de)報(bào)告,但實際(jì)上,這種情況無法(fǎ)避免。那拿(ná)到陽性報告後我們(men)應該怎(zěn)麽辦(bàn)呢?
在(zài)采取任何行動之前(qián),需要第一時間聯係檢測實驗室(shì),確(què)認應如何解讀陽性報告(gào)。雖然大多數情況下,“陽性”意味著感染的存在,但並非所有的“陽性”結(jié)果都(dōu)是可靠的,即使結果可(kě)靠有些(xiē)時候也並不(bú)意味著動物(正在)發生感染,甚至有些時(shí)候(hòu),動物正在感染某種病原(yuán)體,也並不意味著一定要采取幹預措施(shī)。這取決於多個因素,包括病原體(tǐ)的特性、檢測方法的選擇、檢測(cè)工作的質控過程、檢測試劑的可靠性等。和檢測(cè)實驗室的充分溝通可以更準確的了解檢測報告中的(de)“陽性”的可靠性(xìng)和意義,以便決定後續應對措施。
有一些病原體感染具有自限(xiàn)性(例(lì)如MHV、仙台(tái)病毒等),因此(cǐ)在感染後期,常會出(chū)現核酸檢測是陰性但抗體檢測是陽性的情況;而另一些病原體(例如牛棒狀杆菌、MNV等)常會呈現持續性感染,即使沒有臨床症狀,也會長期排毒/菌;采集環境樣本檢測到某種病原體核酸陽性可能是由於新(xīn)發生(shēng)的感染所致(zhì),也可能是既(jì)往感染(rǎn)或其它原因殘留的核酸所致;絕大多數(shù)情況下血清學檢測結果(guǒ)都是可靠的,但是偶爾也會有(yǒu)交(jiāo)叉反應所導致(zhì)的假陽性結果;檢測實驗室的質控水平和試劑的(de)穩定性更是直接決定(dìng)結果是否(fǒu)可靠。
在確認首次(cì)報告的陽(yáng)性結果的可信度後,可能會需要擴大檢測範圍、重新采樣或更換(huàn)檢測方法才能確認被檢測動物是否感染。確認感染後,依然會有諸多因素影響管理者的決策:
01被檢測到陽性的(de)動物來源
尚處於檢疫期的動物中如果檢測到陽(yáng)性(xìng)結果,往往會被拒絕進入設施;如果是已經處於實驗中的動(dòng)物則會根據檢測到的(de)病原體種類再做(zuò)決定,例如是否人獸共患病(bìng)原體,是否影(yǐng)響(xiǎng)動物健康,是否影響實驗數據等;如果是生產性質的(de)設施,通常需要立即采取隔離措(cuò)施,必要(yào)時撲殺和(或)重新淨化動物,同時對環境進行徹底清潔消毒。
02檢測到的病(bìng)原體種類
如果檢測到的病原體是人獸共患病原,例如漢坦病毒、結核分枝杆菌等,則應該立即采取措(cuò)施,隔離並撲殺陽性動物。同時要密切監測與其有直(zhí)接(jiē)或間接接(jiē)觸的同一微生物單元的其它陰性動物(wù),如果是非人靈長類動物,對(duì)每一(yī)個體都應該進行檢測。
而對於(yú)那些對動物健康有影響或者對實驗數據有重要影(yǐng)響的病原體,也應該立即擴大篩查範圍,隔離發生感染的微生物單元,停止(zhǐ)繁殖和(hé)新引進動物,淘汰所有非必要的動物,對珍(zhēn)貴品係,可(kě)重新淨化(huà)。例如發生小鼠肝炎病毒感染或牛棒(bàng)狀杆菌感染,由於它們(men)感染免(miǎn)疫缺陷動物後(hòu)臨床症狀明顯,且顯著影響實驗,大多數管理者都會(huì)選擇(zé)查明感染源和感(gǎn)染範圍,采取措施清除感染。而遇到MNV時,一些設施負責人則(zé)會選擇截然不同的策略,免疫正常和大多數免疫缺陷小鼠感染MNV後不會表現臨床症狀,僅幹擾素α、β、γ受體和STAT1基因(yīn)缺失的小鼠感染MNV後會出現體重減輕、豎毛和弓(gōng)背等全身性(xìng)疾病,且有較高死亡(wáng)率。此(cǐ)外(wài),MNV對巨噬細胞和樹突狀細胞的趨向(xiàng)性可能(néng)會改變免疫反應影響免(miǎn)疫相關研究,還可能會幹擾涉及腸道(dào)疾病的研究。因此不飼養相(xiàng)關小鼠和不做相關研究的設施並不會把MNV作為自己的監測項目;而另一些設施盡管也監測這一項目(mù),但僅僅是為(wéi)了了解動物(wù)感染情況,實行“分級管理”,並不會一刀切地(dì)將所有陽(yáng)性動物都拒之門外;當然,也有管理者(zhě)嚴格要求所有動物必須為陰性,發生感染後會采取清除措(cuò)施。上述“分級管理”的策略盡管是一種妥協,但在(zài)現有條件下可能會更符(fú)合大多數管理者的理念。
此外發生感染(rǎn)後在(zài)設(shè)施內的流行率也會影響決策,例如(rú),在現代設施中如果動物群體中存在呼腸孤病毒-3型感染,流行(háng)率也(yě)隻會維持在非常低的(de)水(shuǐ)平,但如果發生(shēng)MHV感染,即使IVC籠架可(kě)以很(hěn)大程度上減少不同籠(架)動物之間的交叉汙染(rǎn),但由於其極(jí)強的傳播效率,流行(háng)率(lǜ)也可以輕鬆突破50%。因此對於傳播性弱,流行率低的(de)病原(yuán)體(tǐ),管理者往往更能容忍。
另外,如果你的動物供(gòng)應商無(wú)法提供特定病原體陰性的動物,也沒有辦法(fǎ)將(jiāng)其從你的設(shè)施清(qīng)除。近(jìn)幾年,越來越多的機構從出現皮屑症(zhèng)狀的小鼠中分離到木糖葡萄球菌,作為一種條件致病(bìng)菌,其在小鼠皮膚表麵有非常高的檢出率,美國Charles River實(shí)驗室近年公布的數據顯示陽性率為51.8%(n=1426),我國第三方檢測機構蘇州(zhōu)西山生物的(de)檢(jiǎn)測陽性率為43.2%(n=192),幾(jǐ)乎所有的動物供應商(shāng)都沒有將木(mù)糖葡萄球菌列入自己的應排除病原體清單或常規監測清單。在這一背景下,即使檢測到陽性結果,除了對出現症狀的(de)動物進(jìn)行(háng)處理外,並無更多選擇。
03設施(shī)的基本情(qíng)況
設施情況很多(duō)時(shí)候也嚴重影響管理(lǐ)者的決策,包括設施(shī)和種(zhǒng)群總規模,發生(shēng)汙染的區域和種群大小,人力資源是否充足,是否有足夠空間,技術儲備是否充分,項目負責人是否支持(chí)和配合等。對陽性動物進行排查和(hé)處理是一係列高度(dù)專業性的(de)操作,所(suǒ)有參與(yǔ)者之間都要密切配合精(jīng)密運轉,任何環(huán)節的細微漏洞都會讓清除工作功虧一簣。
04預算
預算則是最(zuì)不(bú)可忽(hū)視的一點,不論是篩查確認感染範圍、淘汰感染動(dòng)物、空間(jiān)和(hé)籠器(qì)具的清洗消毒、重新淨(jìng)化或引進動物(wù)、處理後的(de)動物和環境的確認等都需要不菲(fēi)的成本。也正是由(yóu)於一旦發生感染,後續處理成本高昂(áng),對實驗項目的影響大,故而實驗動物從業人員的普遍共識(shí)是預防重(chóng)於治(zhì)理。
綜上所述(shù),在檢測報告中(zhōng)出現陽性(xìng)結果後,首先應(yīng)確認檢測結果的可(kě)靠性並正確(què)解讀(dú)報告,如果確認動物(wù)感染,則需要管理者根據(jù)感染動物的來源、病原體種類、設施(shī)的(de)基本情況、預算等多個因素綜合考慮,決定(dìng)是(shì)容(róng)忍該病原體在自己(jǐ)的設施內有一定程度的流行,還是必須清除。